使用
本產(chǎn)品僅供科研使用，主要用于檢測人成纖維細胞生長因子23在血清、血漿或細胞培養(yǎng)基中的水平。
簡介
成纖維細胞生長因子23（FGF-23）是最近發(fā)現(xiàn)的相關(guān)蛋白大家族中的新成員。其基因編碼為一個250個氨基酸的蛋白。FGF-23(氨基酸 1-24)的氨基酸-末端蛋白是疏水的且很可能用作是允許分泌進入血液循環(huán)的信號肽。它的羧基-末端蛋白(氨基酸 180-251)與其它FGF蛋白家族成員僅有限制的相同氨基酸。FGF-23是與FGF-21 (~24% 的氨基酸次療要相同)和FGF-19 (~22%的氨基酸次序相同) 最接近。
腎臟的磷酸鹽流失障礙導致血磷酸鹽過少是骨骼礦化和生長板發(fā)展缺陷因素之一。有常染色體遺傳的低磷血癥(ADHR)的病人，罕見的遺傳基因混亂，攜帶制造一種不同變化轉(zhuǎn)變的FGF-23 的蛋白質(zhì)的抵抗蛋白水解的裂開。此外，腫瘤能引起瘤原性的骨軟化(OOM)已經(jīng)顯示過量表達的FGF-23 mRNA產(chǎn)生與其相同的效果并且血中異常濃度的FGF-23能導致腎臟的磷酸鹽流失障礙。一致的結(jié)論，在嚙齒動物中應(yīng)用重組的FGF-23顯示增加尿中磷的排泄量因此導致血磷酸鹽過少和骨軟化/佝僂病。總計，所有現(xiàn)在的數(shù)據(jù)建議FGF-23直接或間接與磷酸鹽動態(tài)平穩(wěn)規(guī)則有關(guān)。
測量人FGF-23在血液中循環(huán)可能提供重要的診斷工具用于實驗室評估各種各樣不同的血磷酸鹽流失障礙，包括瘤原性的骨軟化，X-鏈鎖低磷血癥性佝僂病和常染色體遺傳血磷酸鹽過少佝僂病。此外，靈敏地檢測FGF-23可能提供對骨骼和礦物動態(tài)平衡規(guī)則的新的見識。
測試原理
人FGF-23
(C-端) ELISA 試劑盒是雙位點酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清、血漿或細胞培養(yǎng)中FGF-23。兩個親合純化的山羊多克隆抗體經(jīng)過挑選檢測FGF-23的羥基-末端(C-端)的抗原決定部位。一個抗體是固定在微量孔中包被。另一個抗體是生物素與辣根過氧化物酶(HRP)與抗生物素蛋白共扼結(jié)合檢測。
包含FGF-23的樣本與固相捕獲抗體和生物素抗體同時在微量孔中孵育。樣本中包含的FGF-23與捕獲抗體和檢測抗體免疫結(jié)合形成“夾心抗體”復合物：
微量孔/抗人類FGF—人類FGF-23—生物素/抗人類FGF
(C-端)
(C-端)
在這個孵育期末，清洗微量孔去除任何未結(jié)合抗體和其它物質(zhì)。固定的夾心抗體復合物與HRP-抗生素同步孵育允許酶結(jié)合到生物素抗體。在孵育的末期再次清洗微量孔移出未結(jié)合的物質(zhì)。微量孔中的酶結(jié)合物與底物溶液同時孵育反應(yīng)并且用分光光度微量板讀數(shù)儀檢測�？贵w復合物結(jié)合到微量板中的活性與樣本中的FGF-23數(shù)量成正比。標準曲線由繪制吸光度VS每個FGF-23標準品的濃度形成線性或?qū)?shù)曲線。樣本中人類FGF-23的濃度直接從曲線中查找。